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目的 探讨内质网应激(ERS)阻滞剂Salubrinal对人晶状体上皮细胞(HLEC)的保护作用及机制.方法 实验研究.应用H2O2诱导HLEC B3系细胞(HLE-B3)建立氧化应激模型,诱导ERS的发生.分别在H2O2干预和不干预的情况下,加入不同浓度的Salubrinal(10、15、20、25、30、35 μmol/L)培养24 h,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测各组HLE-B3的增殖活性.实验分组为3组,A组(正常对照组)、B组(H2O2200μmol/L组)、C组(H2O2200μmol/L+Salubrinal 25μmol/L组).采用原位缺口末端转移酶标记法(TUNEL)和流式细胞仪(FCM)检测药物作用48 h后HLE-B3的凋亡情况.Westernblot检测不同时间点下各组葡萄糖调节蛋白质78(GRP78)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、半胱氨酸蛋白酶12(Caspase-12)、真核细胞翻译起始因子2α(eIF2α)的磷酸化型p-elF2α的变化.单因素方差分析用于组间均数的多重比较,当方差齐时组间两两差异比较采用Dunnett t检验,当方差不齐时Dunnett's T3用作两两比较.结果 CCK-8试剂盒结果显示,没有H2O2干预时,不同浓度的Salubrinal对HLE-B3的细胞活性无明显抑制作用,存活率分别为(98.6±3.3)%,(98.7±2.6)%,(99.4±3.2)%,(98.6±1.9)%,(98.8±2.5)%,(99.3±3.2)%,(99.5±2.4)%,差异无统计学意义(F=0.09,P=0.10);应用H2O2干预时,随

作者:李云;郑广瑛;刘玥

来源:中华眼科杂志 2016 年 52卷 6期

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作者:
李云;郑广瑛;刘玥
来源:
中华眼科杂志 2016 年 52卷 6期
标签:
晶体 上皮细胞 内质网应激 细胞凋亡 桂皮酸盐类 Lens,crystalline Epithelial cells Endoplasmic reticulum stress Apoptosis Cinnamates
目的 探讨内质网应激(ERS)阻滞剂Salubrinal对人晶状体上皮细胞(HLEC)的保护作用及机制.方法 实验研究.应用H2O2诱导HLEC B3系细胞(HLE-B3)建立氧化应激模型,诱导ERS的发生.分别在H2O2干预和不干预的情况下,加入不同浓度的Salubrinal(10、15、20、25、30、35 μmol/L)培养24 h,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测各组HLE-B3的增殖活性.实验分组为3组,A组(正常对照组)、B组(H2O2200μmol/L组)、C组(H2O2200μmol/L+Salubrinal 25μmol/L组).采用原位缺口末端转移酶标记法(TUNEL)和流式细胞仪(FCM)检测药物作用48 h后HLE-B3的凋亡情况.Westernblot检测不同时间点下各组葡萄糖调节蛋白质78(GRP78)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、半胱氨酸蛋白酶12(Caspase-12)、真核细胞翻译起始因子2α(eIF2α)的磷酸化型p-elF2α的变化.单因素方差分析用于组间均数的多重比较,当方差齐时组间两两差异比较采用Dunnett t检验,当方差不齐时Dunnett's T3用作两两比较.结果 CCK-8试剂盒结果显示,没有H2O2干预时,不同浓度的Salubrinal对HLE-B3的细胞活性无明显抑制作用,存活率分别为(98.6±3.3)%,(98.7±2.6)%,(99.4±3.2)%,(98.6±1.9)%,(98.8±2.5)%,(99.3±3.2)%,(99.5±2.4)%,差异无统计学意义(F=0.09,P=0.10);应用H2O2干预时,随