目的 分析siRNA对前列腺素E2(PGE2)、白介素-1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF-α)和血管内皮生长因子(VEGF)合成的影响.方法 设计4条(1#～4#)环氧化酶-2(hCOX-2)mRNA的小分子干扰RNA(siRNA),设立空白阴性(CTL)和1条随机序列(NC)对照.应用LipofectAMINE 2000将siRNA转染入滑膜成纤维细胞(RASF),4 h后,再加入100 nmol/L的佛波酯.应用RT-PCR和Western印迹分别检测hCOX-2 mRNA和蛋白表达水平.采用ELISA法检测各组上清液中致炎因子水平.结果 转染48 h后,NC、1#～4# siRNA组与CTL组mRNA条带吸光度比值分别为0.72、0.3、0.25、0.4、0.04.转染36和48 h后,各组与CTL组hCOX-2蛋白吸光度比值分别为1.04、0.52、0.39、0.9、0和1.05、0.52、0.51、0.9、0.15;4# siRNA组上清液PGE2、IL-1β、TNF-α、IL-6和VEGF水平较其他各组为低,且与其他处理组相比死亡细胞率差异无统计学意义(P均＞0.05).结论 4#iRNA组能有效抑制COX-2mRNA和蛋白表达,其上清液中致炎因子水平最低,死亡细胞较其他各组无明显增加.
作者：姜林娣；王汉洲；赵凤娣；郭津生；鲍春德；邹和建；王吉耀
来源：中华医学杂志 2007 年 87卷 41期
