目的 探讨自噬对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤的作用.方法 将培养的HUVEC分为正常对照组,ox-LDL组,ox-LDL加雷帕霉素组和ox-LDL加3-甲基腺嘌呤(3-MA)组,分别收集细胞和上清,其细胞用免疫印迹技术检查自噬标记蛋白LC3-Ⅱ/LC-Ⅰ的变化,四氮唑蓝(MTT)法和流式细胞技术检测细胞的增殖及凋亡;上清用于检测乳酸脱氢酶(LDH)活力和内皮素-1(ET-1)的含量.结果 ox-LDL作用能上调HUVEC的LC3-Ⅱ/LC-Ⅰ表达(P＜0.01),增加培养上清中LDH活力(P＜0.01)及ET-1含量(P＜0.05),诱导细胞发生增殖(P=0.028)、凋亡(P＜0.05).雷帕霉素能增加ox-LDL诱导的自噬水平上调,减少其培养上清中LDH活力及ET-1含量的增加(P＜0.05),抑制ox-LDL诱导的细胞增殖.相反,3-MA在下调ox-LDL诱导自噬水平(P＜0.01)的同时,会增加细胞的凋亡及死亡.结论 ox-LDL能通过增加HUVEC LDH漏出率及ET-1分泌水平,促进细胞增殖、凋亡,对内皮细胞产生损伤作用,上调自噬能够减少这种损伤,从而对细胞起到保护作用,反之亦然.
作者：张艳林；曹勇军；尤寿江；李瑞霞；刘慧慧；刘春风
来源：中华医学杂志 2010 年 90卷 39期
