目的 探讨采用一种新型高效的肝癌干细胞分离方法,并对获得的肝癌干细胞进行鉴定.方法 应用无血清肿瘤干细胞培养基,悬浮培养SMMC-7721形成克隆,将悬浮细胞收集后裸鼠皮下接种,并予顺铂干预,取耐药细胞继续悬浮培养获得克隆,分别采用定量PCR、免疫荧光法和流式细胞法检测干细胞和肿瘤干细胞标志的表达情况.结果 在肿瘤干细胞培养基和顺铂的双重筛选下,SMMC-7721能有效形成悬浮生长的细胞克隆.检测结果提示,与普通肝癌细胞相比,获得的干细胞克隆高表达多种干细胞标志NANOG、OCT-4、SOX-2、Notch和肿瘤干细胞标志CD24(90.0％)、CD133(6.1％)、CD90(4.8％),其中尤以CD24最为明显,差异均有统计学意义(均P＜0.01).结论 无血清体外培养+体内增殖+耐药筛选相结合是一种能有效分离纯化肿瘤干细胞的新方法,可从SMMC-7721中分离出具有干细胞特征并高表达CD24的肝癌干细胞克隆.
作者：王涌；刘雅辉；姜建帅；崔翰斌
来源：中华医学杂志 2012 年 92卷 48期
