目的 探讨抗凝血酶(AT)新杂合双突变致遗传性抗凝血酶缺陷症的分子机制.方法 将野生型质粒(AT wt)及突变型质粒(AT-c.134G＞A、AT-c.342T＞G、AT-c.134G＞A和c.342T＞G)瞬时转染HEK293T细胞进行体外表达.Western印迹检测质粒转染细胞裂解液中AT抗原；同源模建构建AT三维空间结构,细胞免疫荧光染色检测AT蛋白在细胞内的分沁情况.结果 Western印迹:AT-c.342T＞G和AT-c.134G＞A和c.342T＞G质粒转染细胞裂解液AT蛋白表达趋势明显增加.同源模建显示第82位碱基突变为Arg后致碱基侧链明显延长,与周围碱基距离缩短.第13位碱基突变为Gln后致局部空间结构改变,与肝素间距离延长.激光共聚焦显示:AT突变体质粒表达蛋白在内质网中聚集增加.结论 新杂合双突变(AT-c.134G＞A和c.342T＞G)致遗传性抗凝血酶缺陷症的分子机制为突变体AT在细胞内潴留,并且AT-c.342T＞G突变起主导作用.
作者：邓昊昱；陈佳佺；谢辉；顾怡；张纪蔚；张皓；周兆熊；梁卫；薛冠华
来源：中华医学杂志 2013 年 93卷 1期
