目的 探讨脂多糖诱导巨噬细胞( RAW264.7细胞)释放的外泌体在小鼠急性肺损伤中的作用及其机制.方法 体外培养RAW264.7细胞,设置对照组和脂多糖刺激组,超速离心法提取两组细胞的外泌体,分别命名为对照EXO组和脂多糖EXO组. (1)体内实验:将18只C57BL/6雄性小鼠按随机数字表法随机均分成正常对照组、正常外泌体组、脂多糖刺激外泌体组各6 只,造模12 h后放血处死,取肺组织行HE染色;行白细胞介素(IL)-1β和肿瘤坏死因子(TNF)-α的免疫组化评价;Western印迹检测各组IL-1β、TNF-α、β-链蛋白、E-钙黏蛋白、紧密连接蛋白1(ZO-1)和封闭蛋白的相对表达量;行组织切片免疫荧光对比各组间封闭蛋白的表达差异. (2)体外实验:将磷酸缓冲盐溶液(PBS)、对照EXO组和脂多糖EXO组外泌体与小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞( MLE-12细胞)共培养,设置空白对照组、对照EXO刺激组、脂多糖EXO刺激组. 12 h后检测胞中IL-1β、TNF-α和封闭蛋白的相对表达量.结果 对照EXO组和脂多糖EXO组鉴定为外泌体. (1)体内实验:脂多糖刺激外泌体组肺组织出现肺泡腔及间质内广泛炎症细胞浸润,肺泡腔内有渗出液,肺泡隔增厚,肺泡及间质充血、出血,部分肺泡塌陷、不张等肺损伤表现;脂多糖刺激外泌体组肺组织中IL-1β和TNF-α蛋白相对表达量均显著高于正常对照组、
作者：郑伯俊；张月；孙娜娜；黄文慧；孟莹
来源：中华医学杂志 2018 年 98卷 22期
