目的 建立以磷酸二氢钾为缓冲体系测定尿液中微量草酸和柠檬酸的毛细管电泳分析法,考察了缓冲液体系选择、缓冲液pH值、缓冲液浓度、分离电压、进样时间对分离测定的影响.方法 在毛细管区带电泳模式下,采用非涂层石英毛细管、磷酸二氢钾缓冲液进行电泳,直接紫外检测.收集2013年2月至3月间复旦大学附属中山医院尿石症患者24 h尿标本5份,健康体检患者24 h尿液标本5份,对该方法进行系统的方法学评价.对优化分离条件下检测的出峰时间与峰面积进行重复性验证,标准样品的浓度线性验证和加样回收率验证.结果 当毛细管柱内径为50 μm,长度为50 cm(有效长度为40 cm)、分离电压为-30 kV、缓冲溶液采用50 mmol/L(pH 6.5)、检测波长为200 nm时,尿液中草酸和柠檬酸在5 min内得到基线分离,草酸和柠檬酸迁移时间和峰面积的批内标准偏差分别小于1.0%和3.0%,批间标准偏差小于2.0%和4.0%,检测限均为1 mg/L,尿液中草酸和柠檬酸浓度在0~500 mg/L范围内线性关系均良好(r=0.999 5、0.995 4,P <0.05),回收率分别为102.38%和92.74%.结论 该方法简单、准确、成本低,可为尿液样品中微量草酸和柠檬酸的分析测定提供参考.
作者:谈绮文;郭玮;顾梅秀;张春燕;潘柏申
来源:中华检验医学杂志 2014 年 37卷 4期