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目的 探讨肿瘤相关成纤维细胞(CAF)是否通过分泌基质细胞衍生因子1(SDF-1)调节肺癌A549细胞的化疗耐药性.方法 采用原代细胞分离方法获得肺癌患者的 CAF,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测A549细胞的增殖能力和对化疗药物的耐药性,荧光定量PCR检测Bcl-xL mRNA水平,Western blot检测Bcl-xL蛋白水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测CAF分泌SDF-1的情况.结果 CAF可以促进肺癌A549细胞的增殖,而正常纤维细胞对A549细胞增殖的影响不明显.培养72 h后,A549+CAF上清组和A549+NF上清组的吸光度(A)值分别为0.814±0.006和0.753±0.006,差异有统计学意义(P<0.05).荧光定量PCR检测结果显示,A549组、A549+NF上清组和A549+CAF上清组的Bcl-xL mRNA表达水平分别为1.00±0.11、1.10±0.09和3.50±0.30,A549+CAF上清组与A549+NF上清组比较,差异有统计学意义(P<0.05).Western blot检测显示,A549组、A549+NF上清组和A549+CAF上清组的Bcl-xL 蛋白表达水平分别为1.00±0.08、1.10±0.12和3.10±0.25,A549+CAF上清组与A549+NF上清组比较,差异有统计学意义(P<0.05).ELISA检测显示,A549+NF上清组和A549+CAF上清组中SDF-1含量分别为3.23±0.02和9.53±0.10,差异有统计学意义(P<0.05).MTT检测显示,A549组、A549+AMD3100组、A549+NF上清组、

作者:邹芳;张志华;张玉妥;赵建清;张秀珑;温翠玲;宋现运;周外民

来源:中华肿瘤杂志 2017 年 39卷 5期

知识库介绍

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邹芳;张志华;张玉妥;赵建清;张秀珑;温翠玲;宋现运;周外民
来源:
中华肿瘤杂志 2017 年 39卷 5期
标签:
肺肿瘤 肿瘤微环境 肿瘤相关成纤维细胞 基质细胞衍生因子1 Bcl-xL 耐药性 Lung neoplasms Tumor microenvironment Cancer-associated-fibroblasts Stromal cell derived factor-1 Bcl-xL Drug resistance
目的 探讨肿瘤相关成纤维细胞(CAF)是否通过分泌基质细胞衍生因子1(SDF-1)调节肺癌A549细胞的化疗耐药性.方法 采用原代细胞分离方法获得肺癌患者的 CAF,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测A549细胞的增殖能力和对化疗药物的耐药性,荧光定量PCR检测Bcl-xL mRNA水平,Western blot检测Bcl-xL蛋白水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测CAF分泌SDF-1的情况.结果 CAF可以促进肺癌A549细胞的增殖,而正常纤维细胞对A549细胞增殖的影响不明显.培养72 h后,A549+CAF上清组和A549+NF上清组的吸光度(A)值分别为0.814±0.006和0.753±0.006,差异有统计学意义(P<0.05).荧光定量PCR检测结果显示,A549组、A549+NF上清组和A549+CAF上清组的Bcl-xL mRNA表达水平分别为1.00±0.11、1.10±0.09和3.50±0.30,A549+CAF上清组与A549+NF上清组比较,差异有统计学意义(P<0.05).Western blot检测显示,A549组、A549+NF上清组和A549+CAF上清组的Bcl-xL 蛋白表达水平分别为1.00±0.08、1.10±0.12和3.10±0.25,A549+CAF上清组与A549+NF上清组比较,差异有统计学意义(P<0.05).ELISA检测显示,A549+NF上清组和A549+CAF上清组中SDF-1含量分别为3.23±0.02和9.53±0.10,差异有统计学意义(P<0.05).MTT检测显示,A549组、A549+AMD3100组、A549+NF上清组、