目的 探讨人结肠癌SW620细胞中miR-138和PDK1基因的表达,阐明miR-138对PDK1基因的靶向调控作用以及对SW620细胞侵袭性的影响.方法 培养SW620细胞并应用免疫荧光检测PDK1基因在细胞中的表达.采用生物信息学方法对miR-138和PDK1基因的靶向匹配关系进行预测并应用双荧光素酶报告基因系统鉴定.脂质体2000转染miR-138模拟物后,qRT-PCR检测miR-138和PDK1基因的表达,Western blot检测PDK1蛋白的表达,Transwell小室检测SW620细胞体外的侵袭性.结果 倒置相差显微镜下可见人结肠癌SW620细胞均匀分布,形态规则均一;细胞免疫荧光显示细胞内有PDK1蛋白的表达,显示红色荧光.靶基因预测软件miRanda和TargetScan显示miR-138和PDK1基因匹配良好,双荧光素酶报告基因系统鉴定发现miR-138能够结合PDKl mRNA 3'UTR并有效抑制其表达.qRT-PCR和Western blot检测结果表明过表达miR-138能够导致PDK1基因表达的下降.Transwell实验表明miR-138的过表达能够抑制SW620细胞的侵袭.结论 miR-138通过靶向作用于PDKl mRNA 3'UTR能够负性调控PDK1基因的表达,并能够抑制人结肠癌SW620细胞的侵袭.
作者：英舟；万义增；陈素贤
来源：肿瘤防治研究 2016 年 43卷 5期
