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目的 探讨沉默MFG-E8基因对SKOV3细胞抗癌药物敏感度的影响及其相关机制.方法 小干扰技术沉默卵巢癌SKOV3细胞中MFG-E8基因并对干扰效率进行测定.CCK-8检测转染MFG-E8 siRNA后SKOV3细胞对顺铂的敏感度.qRT-PCR检测MFG-E8基因沉默后多重耐药蛋白ABCB1及ABCC1 mRNA的表达,qRT-PCR及Western blot检测沉默MFG-E8对ETM相关蛋白的影响.结果 MFG-E8 siRNA可有效沉默MFG-E8蛋白水平的表达;不同浓度顺铂作用于MFG-E8 siRNA转染组与阴性对照组NC siRNA两组细胞48 h后,随药物浓度增高,两组细胞增殖抑制率均上升,MFG-E8 siRNA转染组细胞增殖抑制率上升较明显(P<0.01).3μg/ml顺铂浓度作用于两组细胞48、72 h后,与阴性对照组相比,MFG-E8 siRNA转染组细胞增殖活性明显受到抑制(P<0.05).qRT-PCR结果显示,MFG-E8 siRNA转染组中ABCB1及ABCC1 mRNA表达均明显降低.qRT-PCR及Western blot结果显示,沉默MFG-E8基因可下调SKOV3细胞中N-Cadherin、Vimentin、Snail mRNA及蛋白的表达,上调E-Cadherin mRNA及蛋白表达.结论 沉默MFG-E8基因可增加SKOV3细胞对顺铂的敏感度,下调多重耐药蛋白ABCB1及ABCC1 mRNA表达,其机制可能与沉默MFG-E8抑制EMT进程有关.

作者:李娜;代聪伟;杨艳艳;魏强;邱刚;吴小华

来源:肿瘤防治研究 2021 年 48卷 5期

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作者:
李娜;代聪伟;杨艳艳;魏强;邱刚;吴小华
来源:
肿瘤防治研究 2021 年 48卷 5期
标签:
卵巢癌 MFG-E8 顺铂耐药 耐药基因 EMT
目的 探讨沉默MFG-E8基因对SKOV3细胞抗癌药物敏感度的影响及其相关机制.方法 小干扰技术沉默卵巢癌SKOV3细胞中MFG-E8基因并对干扰效率进行测定.CCK-8检测转染MFG-E8 siRNA后SKOV3细胞对顺铂的敏感度.qRT-PCR检测MFG-E8基因沉默后多重耐药蛋白ABCB1及ABCC1 mRNA的表达,qRT-PCR及Western blot检测沉默MFG-E8对ETM相关蛋白的影响.结果 MFG-E8 siRNA可有效沉默MFG-E8蛋白水平的表达;不同浓度顺铂作用于MFG-E8 siRNA转染组与阴性对照组NC siRNA两组细胞48 h后,随药物浓度增高,两组细胞增殖抑制率均上升,MFG-E8 siRNA转染组细胞增殖抑制率上升较明显(P<0.01).3μg/ml顺铂浓度作用于两组细胞48、72 h后,与阴性对照组相比,MFG-E8 siRNA转染组细胞增殖活性明显受到抑制(P<0.05).qRT-PCR结果显示,MFG-E8 siRNA转染组中ABCB1及ABCC1 mRNA表达均明显降低.qRT-PCR及Western blot结果显示,沉默MFG-E8基因可下调SKOV3细胞中N-Cadherin、Vimentin、Snail mRNA及蛋白的表达,上调E-Cadherin mRNA及蛋白表达.结论 沉默MFG-E8基因可增加SKOV3细胞对顺铂的敏感度,下调多重耐药蛋白ABCB1及ABCC1 mRNA表达,其机制可能与沉默MFG-E8抑制EMT进程有关.