[目的] 将G250抗原cDNA片段转染入sp2/0细胞中并获得稳定表达,为G250基因疫苗研究提供实验工具.[方法] 用脂质体转染法将鉴定好的重组质粒转染入sp2/0细胞中.经G418筛选得到稳定表达,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、间接免疫荧光、Western blot检测G250基因在sp2/0细胞中的表达.[结果] 转染2周后,筛选出阳性sp2/0细胞克隆,通过RT-PCR证实有G250mRNA转录,间接免疫荧光可以见到阳性细胞,Western blot证实有G250抗原表达.[结论] 建立了稳定表达G250抗原的肿瘤细胞模型,为研究基于肾癌G250基因的肿瘤基因疫苗治疗奠定了基础.
作者:张亚东;吴荣佩;刘雷;李乐军;曹开源;李晓飞
来源:中山大学学报(医学科学版) 2008 年 29卷 1期