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目的 观察一氧化氮合酶(Nitrogen oxide synthetase,NOS)在增生性瘢痕与正常皮肤组织及细胞中的表达特征及其差别,并通过应用NO供体或NOS抑制剂对培养的瘢痕成纤维细胞进行体外药物干扰,探索NO、NOS在增生性瘢痕形成中的作用.方法 取临床增牛性瘢痕手术病人的瘢痕组织及周围少许正常皮肤,体外培养获得皮肤和瘢痕成纤维细胞,通过免疫细胞化学及RT-PCR方法比较两种组织及细胞中NOS的表达及分布的差异.分别以100~500μM的NO供体硝普钠(Sodium nitroprussicle,SNP)、NOS抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-Arginine methyl,L-NAME)作用于瘢痕成纤维细胞,观察细胞增殖的变化;并用免疫细胞化学和RT-PCR方法比较作用前后成纤维细胞中Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的变化.结果 免疫组化检测及RT-PCR方法检测显示增生性瘢痕组织及细胞中NOS表达相对于皮肤组织及成纤维细胞中明显减少(p<0.05).瘢痕细胞经SNP作用后,细胞增殖显著降低.免疫细胞化学方法和RT -PCR方法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原结果显示,从SNP 200μM组开始Ⅰ、Ⅲ型胶原表达显著降低(p<0.05).经L-NAME 200μM作用后,Ⅰ、Ⅲ型胶原表达显著增加(p<0.05).结论 增生性瘢痕组织及细胞中NOS含量较正常皮肤组织及细胞明显减少,NO供体SNP对体外培养的增生性瘢痕成纤维细胞增殖以及胶原

作者:王爱丽;杨平;徐顺;顾耀辉;黄静;陈波;贾卿;吴志宏

来源:组织工程与重建外科杂志 2008 年 4卷 1期

知识库介绍

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王爱丽;杨平;徐顺;顾耀辉;黄静;陈波;贾卿;吴志宏
来源:
组织工程与重建外科杂志 2008 年 4卷 1期
标签:
一氧化氮合酶 增生性瘢痕 成纤维细胞 硝普钠 N-硝基-L-精氨酸甲酯
目的 观察一氧化氮合酶(Nitrogen oxide synthetase,NOS)在增生性瘢痕与正常皮肤组织及细胞中的表达特征及其差别,并通过应用NO供体或NOS抑制剂对培养的瘢痕成纤维细胞进行体外药物干扰,探索NO、NOS在增生性瘢痕形成中的作用.方法 取临床增牛性瘢痕手术病人的瘢痕组织及周围少许正常皮肤,体外培养获得皮肤和瘢痕成纤维细胞,通过免疫细胞化学及RT-PCR方法比较两种组织及细胞中NOS的表达及分布的差异.分别以100~500μM的NO供体硝普钠(Sodium nitroprussicle,SNP)、NOS抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-Arginine methyl,L-NAME)作用于瘢痕成纤维细胞,观察细胞增殖的变化;并用免疫细胞化学和RT-PCR方法比较作用前后成纤维细胞中Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的变化.结果 免疫组化检测及RT-PCR方法检测显示增生性瘢痕组织及细胞中NOS表达相对于皮肤组织及成纤维细胞中明显减少(p<0.05).瘢痕细胞经SNP作用后,细胞增殖显著降低.免疫细胞化学方法和RT -PCR方法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原结果显示,从SNP 200μM组开始Ⅰ、Ⅲ型胶原表达显著降低(p<0.05).经L-NAME 200μM作用后,Ⅰ、Ⅲ型胶原表达显著增加(p<0.05).结论 增生性瘢痕组织及细胞中NOS含量较正常皮肤组织及细胞明显减少,NO供体SNP对体外培养的增生性瘢痕成纤维细胞增殖以及胶原