目的 利用化学激活的技术,建立小鼠孤雌胚胎干细胞系.方法 用钙离子载体A23187和6-二甲基氨基嘌呤(6-DMAP)处理小鼠卵母细胞,待囊胚形成后,分离内细胞团,细胞传代、扩增.待传至37代时,核型检测查染色体,用微卫星技术进行纯合性鉴定,用免疫荧光技术检测胚胎干细胞表面标记Oct-4、SSEA-1及SSEA-4的表达情况,并用畸胎瘤试验检测其多向分化能力.结果 该细胞株为孤雌来源,表现为正常二倍体核型,表达ALK,表面标志物Oct-4、SSEA-1阳性,SSEA-4阴性.体内注射后,在局部形成含三个胚层组织的畸胎瘤.结论 通过钙离子载体A23187和6-DMAP化学激活小鼠卵母细胞,可以得到具有胚胎干细胞特性的细胞株.
作者：王彦；钱德俭；韦多；徐凯；宦晴；吕鸿；高选；陈子江
来源：组织工程与重建外科杂志 2010 年 06卷 3期
