目的 探讨结核菌素纯蛋白衍生物(pure protein derivative,PPD)对人外周血γδT细胞的刺激效应.方法 采用Ficoll密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)后,经尼龙毛柱法分离得T细胞.分别以卡介苗和PPD刺激γδT细胞,流式细胞仪分选纯化γδT细胞,并检测其抗原提呈细胞表型.按照T细胞培养基成分将实验分为4组(n=20):①空白组:结核分枝杆菌分泌性抗原(Mtb-Sag)25 μg/ml+CFSE标记的T淋巴细胞;②卡介苗(BCG)组:BCG刺激γδT细胞+Mtb-Sag 25 μg/ml+CFSE标记T淋巴细胞;③PPD组:PPD刺激γδT细胞 + Mtb-Sag 25 μg/ml+CFSE标记T淋巴细胞;④树突状细胞(dendritic cell,DC)组:成熟DC+Mtb-Sag 25 μg/ml+CFSE标记T淋巴细胞.9 d后检测T细胞及CD4+T细胞的增殖情况.结果 与静止期相比,PPD可刺激γδT细胞CD80、CD86和HLA-DR表达水平升高至(39.07±1.26)
作者：黄方；杜先智
来源：第三军医大学学报 2011 年 33卷 5期
