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目的:探讨卡介苗(BCG)与ESAT-6激活的人外周血γδT细胞是否具有抗原提呈细胞的表型和功能.方法:用Ficoll密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞(PBMC)后,经尼龙毛柱法分离获得T细胞.将T细胞分别用卡介苗与ESAT-6刺激扩增γδT细胞后用流式细胞仪分选纯化γδT细胞,并检测其抗原提呈细胞表型.PBMC用贴壁法制备单核细胞后,诱导培养分化为成熟DC细胞,用流式细胞仪检测其成熟程度.T细胞用CFSE标记后分别按四种方法培养:①与结核分枝杆菌分泌性抗原(Mtb-Sag)共同培养;②与Mtb-Sag孵育2小时后的卡介苗激活的γδT细胞共同培养;③与Mtb-Sag孵育2小时后的ESAT-6激活的γδT细胞共同培养;④与Mtb-Sag孵育2小时后的成熟DC细胞共同培养;培养后检测T细胞及CD4+T细胞的增殖情况.结果:卡介苗与ESAT-6激活的γδT细胞CD80、CD86、HLA-DR的表达水平都增加,且后者显著高于前者.卡介苗与ESAT-6激活的γδT细胞培养组的T细胞增殖总数及CD4+T细胞的增殖有所增加;而后者显著高于前者,与成熟DC细胞培养组的增殖情况相似.结论:用卡介苗与ESAT-6激活的人外周血γδT细胞都具有抗原提呈细胞的表型和抗原提呈作用;但后者显著高于前者.

作者:何愉胜;杜先智

来源:中国免疫学杂志 2011 年 27卷 3期

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作者:
何愉胜;杜先智
来源:
中国免疫学杂志 2011 年 27卷 3期
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卡介苗 ESAT-6 抗原提呈 γδT细胞 流式细胞术
目的:探讨卡介苗(BCG)与ESAT-6激活的人外周血γδT细胞是否具有抗原提呈细胞的表型和功能.方法:用Ficoll密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞(PBMC)后,经尼龙毛柱法分离获得T细胞.将T细胞分别用卡介苗与ESAT-6刺激扩增γδT细胞后用流式细胞仪分选纯化γδT细胞,并检测其抗原提呈细胞表型.PBMC用贴壁法制备单核细胞后,诱导培养分化为成熟DC细胞,用流式细胞仪检测其成熟程度.T细胞用CFSE标记后分别按四种方法培养:①与结核分枝杆菌分泌性抗原(Mtb-Sag)共同培养;②与Mtb-Sag孵育2小时后的卡介苗激活的γδT细胞共同培养;③与Mtb-Sag孵育2小时后的ESAT-6激活的γδT细胞共同培养;④与Mtb-Sag孵育2小时后的成熟DC细胞共同培养;培养后检测T细胞及CD4+T细胞的增殖情况.结果:卡介苗与ESAT-6激活的γδT细胞CD80、CD86、HLA-DR的表达水平都增加,且后者显著高于前者.卡介苗与ESAT-6激活的γδT细胞培养组的T细胞增殖总数及CD4+T细胞的增殖有所增加;而后者显著高于前者,与成熟DC细胞培养组的增殖情况相似.结论:用卡介苗与ESAT-6激活的人外周血γδT细胞都具有抗原提呈细胞的表型和抗原提呈作用;但后者显著高于前者.