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目的 探讨在高糖培养的系膜细胞中miR-449a与Trim11结合对细胞增殖的调控作用.方法 RT-qPCR检测miR-449a在高糖(25 mmol/L)和低糖(5.5 mmol/L)培养的系膜细胞中的表达;EdU检测miR-449a及Trim11对系膜细胞增殖的影响;生物信息学预测miR-449a与Trim11的结合位点;双荧光素酶验证miR-449a与Trim11靶向作用;Western blot检测上调、下调miR-449a后Trim11蛋白的变化.结果 与低糖组比较,miR-449a在高糖培养的系膜细胞中的表达显著降低(P<0.01);双荧光素酶证实miR-449a直接靶向Trim11,过表达miR-449a后,细胞增殖减少,Trim11蛋白水平显著降低(P<0.01);沉默miR-449a,细胞增殖增加,Trim 11蛋白水平显著上调(P<0.01);沉默Trim 11后,抑制miR-449a对于细胞增殖促进作用被阻止.结论 miR-449a可抑制系膜细胞增殖,其机制可能与抑制靶基因Trim11的表达有关,可能是糖尿病肾病的重要保护性因子.

作者:陈雯韵;孙艳;彭睿;彭惠民;张政

来源:第三军医大学学报 2019 年 41卷 16期

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作者:
陈雯韵;孙艳;彭睿;彭惠民;张政
来源:
第三军医大学学报 2019 年 41卷 16期
标签:
肾小球系膜细胞 miR-449a Trim11 细胞增殖
目的 探讨在高糖培养的系膜细胞中miR-449a与Trim11结合对细胞增殖的调控作用.方法 RT-qPCR检测miR-449a在高糖(25 mmol/L)和低糖(5.5 mmol/L)培养的系膜细胞中的表达;EdU检测miR-449a及Trim11对系膜细胞增殖的影响;生物信息学预测miR-449a与Trim11的结合位点;双荧光素酶验证miR-449a与Trim11靶向作用;Western blot检测上调、下调miR-449a后Trim11蛋白的变化.结果 与低糖组比较,miR-449a在高糖培养的系膜细胞中的表达显著降低(P<0.01);双荧光素酶证实miR-449a直接靶向Trim11,过表达miR-449a后,细胞增殖减少,Trim11蛋白水平显著降低(P<0.01);沉默miR-449a,细胞增殖增加,Trim 11蛋白水平显著上调(P<0.01);沉默Trim 11后,抑制miR-449a对于细胞增殖促进作用被阻止.结论 miR-449a可抑制系膜细胞增殖,其机制可能与抑制靶基因Trim11的表达有关,可能是糖尿病肾病的重要保护性因子.