背景与目的:哺乳动物细胞中雷帕霉素靶蛋白(mammalian target ofrapamycin,mTOR)信号途径调节细胞生长、增殖、存活和凋亡.本实验是研究雷帕霉素对前列腺癌PC-3细胞的作用及其机制.方法:培养前列腺癌PC-3细胞,采用MTT法检测雷帕霉素1 nmol/L作用24 h、36 h、48 h、72 h后PC-3细胞增殖的改变,流式细胞术检测作用不同时间细胞周期的改变,Western blot检测雷帕霉素作用PC-3细胞24 h、36 h、48 h、72 h后raptor、ficmr、Akt、pS6k1-T389、pAkt-s473的表达情况.结果:MTT结果显示雷帕霉素在作用24 h时,促进了PC-3细胞增殖,但在36 h显著抑制PC-3细胞增殖(P<0.01),72 h时抑制作用更明显.FCM结果显示雷帕霉素作用24 h时S期细胞有所增加,但作用36、48、72 h后PC-3细胞的G1期细胞逐渐增加.使PC-3细胞周期主要阻滞在G1期.Western blot检测结果显示雷帕霉素作用24 h时显著抑制raptor和pS6k1-T389的表达(P<0.01);rietor、Akt表达并没有显著变化:pAkt-ss473表达在雷帕霉素作用24 h时反而显著增加(P<0.01),但在36 h后即被显著抑制,72 h几乎完全被抑制(P<0.01).结论:延长雷帕霉素作用时间可抑制PC-3细胞增殖.其机制可能与雷帕霉素阻滞细胞周期、抑制Akt磷酸化有关.
作者:庄乾元;陈先国;董自强;刘继红;叶章群
来源:癌症 2009 年 28卷 8期