目的 探讨神经前体细胞表达下调因子4(NEDD4)基因沉默对膀胱癌细胞株T24和RT4增殖、迁移和侵袭的影响.方法 采用脂质体转染技术将合成的三对NEDD4小干扰RNA(NEDD4siRNA1、NEDD4siRNA2、NEDD4siRNA3)分别转染膀胱癌细胞T24和RT4,转染48 h后应用RT-PCR法和Western blotting法检测NEDD4的mRNA和蛋白表达,筛选出于扰效率最高的siRNA,并进一步检测转染干扰效率最高的siRNA对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响;取T24和RT4细胞,设立空白对照组、阴性对照组和实验组,空白对照组为野生型T24和RT4细胞,不予转染;阴性对照组细胞转染Negative Control siRNA,实验组细胞转染NEDD4siRNA-2.转染48 h后提取蛋白质,Western blotting法检测NEDD4蛋白及其下游靶蛋白PTEN和p73表达.结果 NEDD4的三对siRNA均可下调NEDD4表达,其中NEDD4siRNA2效率最高;与阴性对照相比,实验组T24和RT4细胞增殖、迁移和侵袭能力均下降(P均＜0.01).与阴性对照组相比,实验组NEDD4蛋白及其下游靶蛋白PTEN和p73表达均增加(P均＜o.oo1).结论 NEDD4基因沉默能抑制膀胱癌细胞的增殖、迁移和侵袭.
作者：杨传来；李巧巧；夏任兰；孙兴伟
来源：山东医药 2019 年 59卷 16期
