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目的:克隆小鼠内皮抑素(mEndostatin)编码区cDNA序列并构建含Egr-1启动子的IFNγ和mEndostatin双基因表达载体.方法:利用逆转录多聚酶链反应法(RT-PCR),以小鼠肝细胞mRNA为模板,扩增获得全长mEndostatin,与pMD18T载体连接作全自动测序,并利用基因重组技术构建含Egr-1启动子的IFNγ和mEndostatin双基因表达质粒.结果:经测序证实获得的mEndostatin序列与文献报道完全一致,并构建了含Egr-1启动子的IFNγ和mEndostatin双基因表达质粒pEgr-IFNγ-mEndostatin.结论:利用RT-PCR法成功克隆了mEndostatin的cDNA序列,构建了pEgr-IFNγ-mEndostatin重组双基因表达质粒.

作者:杨巍;刘林林;孙婷;李秀娟;田梅;朴春姬;潘艳;李修义

来源:吉林大学学报(医学版) 2004 年 30卷 1期

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作者:
杨巍;刘林林;孙婷;李秀娟;田梅;朴春姬;潘艳;李修义
来源:
吉林大学学报(医学版) 2004 年 30卷 1期
标签:
内皮抑素 质粒/遗传学 干扰素Ⅰ型,Egr-1 pEgr-IFNγ-mEndostatin
目的:克隆小鼠内皮抑素(mEndostatin)编码区cDNA序列并构建含Egr-1启动子的IFNγ和mEndostatin双基因表达载体.方法:利用逆转录多聚酶链反应法(RT-PCR),以小鼠肝细胞mRNA为模板,扩增获得全长mEndostatin,与pMD18T载体连接作全自动测序,并利用基因重组技术构建含Egr-1启动子的IFNγ和mEndostatin双基因表达质粒.结果:经测序证实获得的mEndostatin序列与文献报道完全一致,并构建了含Egr-1启动子的IFNγ和mEndostatin双基因表达质粒pEgr-IFNγ-mEndostatin.结论:利用RT-PCR法成功克隆了mEndostatin的cDNA序列,构建了pEgr-IFNγ-mEndostatin重组双基因表达质粒.