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目的:观察乳鼠心肌成纤维细胞在高浓度葡萄糖作用下胶原蛋白分泌和细胞增殖及Wnt信号通路调控的变化.方法:基于高糖刺激诱导心肌成纤维细胞体外增殖的培养方法,CCK8法检测细胞增殖能力;流式细胞仪检测细胞的增殖周期;ELISA法观察细胞TGF-β1蛋白及Ⅰ型、Ⅲ型胶原的分泌能力;western blot法检测蛋白β-catenin,GSK-3β,P-GSK-3β的表达水平;观察心肌成纤维细胞在高糖环境中Wnt信号通路传导的变化.结果:高浓度葡萄糖环境可以引起细胞的增殖(P<0.01);促进TGF-β1的合成(P<0.01);提高细胞Ⅰ型、Ⅲ型胶原分泌的能力(P<0.01);在分子水平上可以增强β-catenin的表达(P<0.01),抑制P-GSK-3β的表达(P<0.05).结论:心肌成纤维细胞在高糖环境中增殖明显,心肌成纤维细胞TGF-β1和胶原的分泌会增加,引发Wnt信号通路的异常表达.研究其作用机制,对糖尿病心肌纤维化的防治及研究具有重大意义.

作者:韩路拓;刘建勋;杨佳妹;王冬芝;王天龙;任钧国

来源:成都中医药大学学报 2017 年 40卷 4期

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作者:
韩路拓;刘建勋;杨佳妹;王冬芝;王天龙;任钧国
来源:
成都中医药大学学报 2017 年 40卷 4期
标签:
心肌成纤维细胞 Wnt信号通路 高糖作用 调控变化 Cardiac fibroblasts Wnt signal pathway High glucose effect Regulation change
目的:观察乳鼠心肌成纤维细胞在高浓度葡萄糖作用下胶原蛋白分泌和细胞增殖及Wnt信号通路调控的变化.方法:基于高糖刺激诱导心肌成纤维细胞体外增殖的培养方法,CCK8法检测细胞增殖能力;流式细胞仪检测细胞的增殖周期;ELISA法观察细胞TGF-β1蛋白及Ⅰ型、Ⅲ型胶原的分泌能力;western blot法检测蛋白β-catenin,GSK-3β,P-GSK-3β的表达水平;观察心肌成纤维细胞在高糖环境中Wnt信号通路传导的变化.结果:高浓度葡萄糖环境可以引起细胞的增殖(P<0.01);促进TGF-β1的合成(P<0.01);提高细胞Ⅰ型、Ⅲ型胶原分泌的能力(P<0.01);在分子水平上可以增强β-catenin的表达(P<0.01),抑制P-GSK-3β的表达(P<0.05).结论:心肌成纤维细胞在高糖环境中增殖明显,心肌成纤维细胞TGF-β1和胶原的分泌会增加,引发Wnt信号通路的异常表达.研究其作用机制,对糖尿病心肌纤维化的防治及研究具有重大意义.