目的 探究配对盒基因6(Pax6)对血小板衍生因子(PDGF-BB)诱导下人肝星状细胞迁移能力的影响.方法 体外培养人肝星状细胞系(LX-2),慢病毒感染LX-2敲减Pax6,使用PDGF-BB诱导其活化,实验分为4组:空白组(shNC+PBS)、实验组(shPax6+PBS)、PDGF-BB处理的空白组(shNC+PDGF-BB)、PDGF-BB处理的实验组(shPax6+PDGF-BB);采用划痕实验、Transwell小室细胞迁移实验,分析细胞迁移能力;细胞免疫荧光及蛋白质印迹技术检测细胞迁移相关蛋白的表达水平.结果 PDGF-BB诱导下的LX-2活化,可促进其迁移能力增强;敲降Pax6后,能够抑制活化后细胞增强的迁移能力;蛋白质印迹技术实验结果表明,PDGF-BB刺激下能明显上调LX-2中N-cad表达、抑制E-cad表达;敲降Pax6后能抑制PDGF-BB诱导的N-cad表达、增加E-cad表达;细胞免疫荧光实验结果显示,PDGF-BB诱导下能明显上调Vimentin表达,敲降Pax6后,PDGF-BB对Vimentin的上调作用被抑制,E-cad与N-cad趋势同上述蛋白质印迹技术检测结果一致.结论 敲降Pax6能抑制PDGF-BB诱导下LX-2增强的迁移能力,为临床抗肝纤维化药物开发提供了可能靶点,为治疗肝纤维化提供了新的策略.
作者:张迪;谭悦浩;刘漪沦;李灿;刘蓉;胡雪;唐斌;邓峰美
来源:成都医学院学报 2022 年 17卷 4期