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目的:观察 TGF‐β1在肾小球内皮细胞‐间充质细胞转分化(EndM T )中的作用,探讨 ILK 介导 TGF‐β/Smad 信号通路在 EndM T 过程中的作用。方法以体外培养人肾小球内皮细胞为研究对象,分为空白对照组、TGF‐β112.5、25.0、50.0 ng/mL 组、TGF‐β150.0 ng/mL +Ⅰ型受体抑制剂(LY364749)5.0μmol/L 组和 ILK 抑制剂(QLT‐0267)5.0μmol/L 组,各组细胞在上述处理因素下培养48、72 h ,以 RT‐PCR 测定 P‐Smad2/3和 ILK mRNA 的表达水平,以 Western blot 测定 P‐Smad2/3、ILK 及E‐cadherin 、CD31、α‐SMA 和 FSP‐1蛋白的表达水平。结果(1)TGF‐β1可剂量依赖性诱导 HGEnCP‐Smad2/3和 ILK mRNA 水平显著升高(P<0.01)以及 P‐Smad2/3、ILK 、α‐SMA 和 FSP‐1蛋白水平显著升高(P<0.01),但是剂量依赖性诱导 E‐cadherin 和CD31蛋白水平显著降低(P<0.01);(2)TGF‐β1Ⅰ型受体抑制剂和 ILK 抑制剂可显著抑制 TGF‐β1诱导 ILK mRNA 水平的升高(P<0.01)以及 ILK 、α‐SMA 和 FSP‐1蛋白水平的升高(P <0.01),抑制 E‐cadherin 和 CD31蛋白水平的降低(P<0.01);(3) TGF‐β1Ⅰ型受体抑制剂可显著抑制 TGF‐β1诱导 P‐Smad2/3 mRNA 和蛋白

作者:林琳;郑晶;朱伟平

来源:重庆医学 2015 年 28期

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作者:
林琳;郑晶;朱伟平
来源:
重庆医学 2015 年 28期
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整合素连接激酶 人肾小球内皮细胞 肾小球内皮细胞-间充质细胞转分化 转化生长因子-β1 integrin linked kinase human glomerular endothelial cells endothelial-mesenchymal transition transforming
目的:观察 TGF‐β1在肾小球内皮细胞‐间充质细胞转分化(EndM T )中的作用,探讨 ILK 介导 TGF‐β/Smad 信号通路在 EndM T 过程中的作用。方法以体外培养人肾小球内皮细胞为研究对象,分为空白对照组、TGF‐β112.5、25.0、50.0 ng/mL 组、TGF‐β150.0 ng/mL +Ⅰ型受体抑制剂(LY364749)5.0μmol/L 组和 ILK 抑制剂(QLT‐0267)5.0μmol/L 组,各组细胞在上述处理因素下培养48、72 h ,以 RT‐PCR 测定 P‐Smad2/3和 ILK mRNA 的表达水平,以 Western blot 测定 P‐Smad2/3、ILK 及E‐cadherin 、CD31、α‐SMA 和 FSP‐1蛋白的表达水平。结果(1)TGF‐β1可剂量依赖性诱导 HGEnCP‐Smad2/3和 ILK mRNA 水平显著升高(P<0.01)以及 P‐Smad2/3、ILK 、α‐SMA 和 FSP‐1蛋白水平显著升高(P<0.01),但是剂量依赖性诱导 E‐cadherin 和CD31蛋白水平显著降低(P<0.01);(2)TGF‐β1Ⅰ型受体抑制剂和 ILK 抑制剂可显著抑制 TGF‐β1诱导 ILK mRNA 水平的升高(P<0.01)以及 ILK 、α‐SMA 和 FSP‐1蛋白水平的升高(P <0.01),抑制 E‐cadherin 和 CD31蛋白水平的降低(P<0.01);(3) TGF‐β1Ⅰ型受体抑制剂可显著抑制 TGF‐β1诱导 P‐Smad2/3 mRNA 和蛋白