目的 探讨西尼罗病毒(WNV)感染人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y后对p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)途径的影响,以及该途径在WNV复制及应激应答、炎性应答相关分子表达调控中的作用.方法 WNV分别短时孵育(5、15、30、60 min)和感染(12、24、48、60 h)SH-SY5Y细胞,用蛋白质印迹法检测p38 MAPK和磷酸化p38 MAPK表达,用qRT-PCR检测WNV感染细胞内C/EBP同源蛋白(CHOP)、白细胞介素6(IL-6)、活化转录因子6α(ATF6α)和干扰素刺激基因15 (ISG15) mRNA表达水平的动态变化.用WNV感染p38 MAPK siRNA转染的SH-SY5Y细胞,用qRT-PCR检测WNV RNA水平及CHOP、IL-6、ATF6α和ISG15 mRNA水平.结果 与未孵育的细胞相比,WNV短时孵育细胞内p38 MAPK的磷酸化水平升高.WNV感染SH-SY5Y细胞12 h、24 h时激活了p38 MAPK途径,而感染48 h、60 h时明显抑制了p38 MAPK途径.WNV感染促进了CHOP、IL-6和ISG15 mRNA表达而抑制了ATF6α mRNA表达.与对照siRNA转染的细胞相比,p38 MAPK siRNA转染的细胞内WNV RNA(P<0.05)水平和ATF6α mRNA (P<0.01)水平升高,而CHOPmRNA水平降低(P<0.05).结论 WNV感染早期激活了p38 MAPK途径,该途径的激活可能负反馈调控WNV的复制.WNV经p38 MAPK途径调控与应激应答相关的CHOP、ATF6α表达及与炎性应答相关的IL-6表达.
作者:徐铮昊;唐海琳;任瑞文;赵平;戚中田;赵兰娟
来源:第二军医大学学报 2019 年 40卷 11期