目的 建立三重TaqMan实时荧光定量PCR体系,快速诊断21、X染色体数目异常.方法 选取21号染色体唐氏综合征特异区域(DSCR3)和X染色体1113K DNA序列范围分别作为21号和X染色体目的 基因,同时选择12号染色体上磷酸甘油醛脱氢酶基因(GAPDH)为参比基因,分别设计引物和TaqMan探针,经PCR反应体系优化,采用单管三重及2-ΔΔCt相对定量数据分析,根据基因拷贝数变化诊断21号和X染色体数目异常,并进行方法学应用评价.结果 通过优化,模板量在5~30 ng/μl时3个基因都可以得到有效扩增,目的 基因和参照基因扩增效率基本一致,均接近100
作者:刘彦慧;吴亚敏;黎丽芬;李超强;周万军
来源:第三军医大学学报 2010 年 32卷 13期