为了建立一种基于多重实时荧光相对定量PCR技术并应用之于唐氏综合征分子诊断,选择21号染色体上唐氏综合征特异区域基因片段(DSCR3)为目的基因,以12号染色体上的磷酸甘油醛脱氢酶基因(GAPDH)为参照基因,设计合成两对引物以及分别以不同荧光标记的TaqMan探针,在同一个反应管中进行扩增.以相对定量指标△CT值区分唐氏综合征患者与正常人.采用EB病毒转化技术,把唐氏综合征患者外周血B淋巴细胞转化成永生淋巴母细胞系作为标准品.通过优化反应条件,使得目的基因和参照基因的扩增效率基本一致,接近100
作者:GAO Bin;邹起练;黄尚志;王立荣;钮淑兰;XIAO Bai;YAN Mei;LEI Zhen;JIA Xing-Yuan;WANG Zhan-Yong;YUAN Hai-Xin;WU Yan;LIU Jing-Zhong
来源:遗传 2007 年 29卷 8期