目的 探讨蛋白激酶D(PKD)与鞘氨醇激酶2(SphK2)参与调控丁酸钠诱导的人肝癌HepG2细胞凋亡的分子机制.方法 采用流式细胞仪检测不同浓度丁酸钠作用48 h后人肝癌HepG2细胞的凋亡率,以及干扰或过表达PKD或SphK2对丁酸钠诱导人肝癌HepG2细胞凋亡率的影响;并且在分别干扰PKD或SphK2后以免疫印迹法检测其对丁酸钠诱导另一蛋白激活(磷酸化)的影响.结果 丁酸钠能明显诱导HepG2细胞凋亡(P＜0.01),且具有浓度依赖性;而在PKD或SphK2被干扰后,丁酸钠诱导细胞凋亡率比未干扰细胞明显增高(P＜0.01),而过表达PKD或SphK2的细胞在丁酸钠作用下其凋亡率比空质粒对照组细胞明显下降(P＜0.01),并且干扰PKD可阻断丁酸钠诱导的SphK2激活(P＜0.01),而干扰SphK2则对PKD的激活无影响(P＜0.01).结论 PKD和SphK2均可负性调控丁酸钠诱导的HepG2细胞凋亡.
作者：肖敏；李琛；袁汉尧；刘云岗
来源：第三军医大学学报 2014 年 36卷 3期
