目的:克隆和在原核表达系统中表达超嗜热古球菌KOD1(hyperthermophilic Pyrococcus sp.KOD1, HPK)之热休克蛋白基因β亚基(cpkB). 方法:用PCR技术从HPK基因组DNA中扩增cpkB基因片段,经克隆和核苷酸序列分析后再克隆至原核表达载体pBV220,升温诱导cpkB基因表达,利用CpkB蛋白的耐高温特性纯化该蛋白. 结果:扩增和克隆了1.6 kb的cpkB基因,并经DNA测序证实,实现了cpkB基因在原核系统PLPR启动子控制下的表达,建立了纯化CpkB蛋白的方法. 结论:该研究为进一步探讨CpkB蛋白的结构与功能奠定了基础.
作者:颜真;王俊楼;韩苇;赵永同;张英起;苏成芝
来源:第四军医大学学报 1999 年 20卷 7期