目的: 探索p16基因在喉癌细胞内的表达作用及基因治疗方面的应用前景.方法: 采用亚克隆技术,构建p16真核表达载体pCDNA3- p16. 利用lipofectamine介导,将外源野生型p16基因导入喉癌细胞系Hep-2,筛选阳性克隆,采用打点杂交技术、免疫荧光、免疫组化、图像分析法观察和分析p16基因的表达.同时以空载体质粒pCDNA3为对照,用流式细胞仪分析瘤细胞生长周期、荧光染色检测细胞凋亡.结果: 打点杂交、免疫荧光、免疫组化及图像分析法分析证实转染p16基因的Hep-2细胞有外源p16基因的表达,外源基因p16在Hep-2细胞系中的表达能抑制Hep-2细胞系的生长.流式细胞仪计数和免疫荧光检测证实p16能诱导喉癌细胞系Hep-2发生凋亡并导致其发生G1期阻滞.结论: 导入外源野生型p16基因可抑制喉癌细胞恶性增殖.
作者:孙永柱;崔鹏程;陈文弦;李贵泽;朱春生
来源:第四军医大学学报 2003 年 24卷 4期