目的 探讨miRNA-31在高糖诱导的内皮细胞功能障碍中的作用机制.方法 体外培养人冠状动脉内皮细胞系,不同浓度高糖刺激24h后检测细胞内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白表达及培养上清液NO含量;Real-time PCR检测高糖刺激后miRNA-31表达变化;microRNA在线分析软件预测并应用双荧光素酶报告基因系统和Western blot验证eNOS是否为miRNA-31的直接靶基因;通过转染miRNA-31 antagomir观察miR-NA-31对内皮细胞功能障碍的影响.结果 不同浓度的高糖刺激内皮细胞24h后,eNOS蛋白表达和培养液NO含量呈剂量依赖性下降.高糖刺激内皮细胞miRNA-31表达明显增加.microRNA在线分析软件及双荧光素酶报告基因实验提示eNOS的翻译水平受miRNA-31直接调控.转染miRNA-31 antagomir明显上调高糖刺激后内皮细胞eNOS蛋白和培养液NO含量.结论 miRNA-31上调进而抑制eNOS表达可能是高糖诱导内皮细胞功能障碍的作用机制之一.
作者:刘慰华;黎佼;刘彬;刘少军;刘本荣;刘世明
来源:广东医学 2014 年 35卷 22期