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目的 探讨一种简单有效的SD大鼠乳鼠心肌细胞分离与培养方法.方法 取出生24 h以内的大鼠心室,0.08%的胰蛋白酶反复消化多次,离心收集心肌细胞,差速培养后5-溴脱氧尿嘧啶核苷纯化心肌细胞.用全细胞膜片钳方法,记录心肌细胞动作电位,并用激光共聚焦显微镜观察钙瞬变、线粒体膜电位.结果 心肌细胞存活率大于93%,心肌细胞纯度大于96%,细胞形态良好,出现节律性搏动,钙瞬变波形稳定、规律,动作电位和线粒体膜电位均正常.结论 本研究方法分离心肌细胞存活率高、活性好,是一种简单、高效的心肌细胞原代培养方法,可广泛应用于各种研究.

作者:黄礼杰;陈耀旭;杨莹莹;殷春霞;陈睿;韩福平;唐羽欣;谭文

来源:广东药学院学报 2015 年 31卷 3期

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作者:
黄礼杰;陈耀旭;杨莹莹;殷春霞;陈睿;韩福平;唐羽欣;谭文
来源:
广东药学院学报 2015 年 31卷 3期
标签:
新生大鼠 心肌细胞 原代培养 钙瞬变 线粒体膜电位 动作电位 neonatal rat myocardial cells primary culture calcium transients mitochondrial membrane potential action potential
目的 探讨一种简单有效的SD大鼠乳鼠心肌细胞分离与培养方法.方法 取出生24 h以内的大鼠心室,0.08%的胰蛋白酶反复消化多次,离心收集心肌细胞,差速培养后5-溴脱氧尿嘧啶核苷纯化心肌细胞.用全细胞膜片钳方法,记录心肌细胞动作电位,并用激光共聚焦显微镜观察钙瞬变、线粒体膜电位.结果 心肌细胞存活率大于93%,心肌细胞纯度大于96%,细胞形态良好,出现节律性搏动,钙瞬变波形稳定、规律,动作电位和线粒体膜电位均正常.结论 本研究方法分离心肌细胞存活率高、活性好,是一种简单、高效的心肌细胞原代培养方法,可广泛应用于各种研究.