目的：探讨甲基化酶抑制剂5’‐氮杂‐2’‐脱氧胞苷（5’‐Aza‐2’‐deoxycytidine ，5’‐Aza‐CdR）对结直肠癌细胞株HT‐29和LoVo中Runx3基因甲基化水平、mRNA及蛋白表达的影响。方法用不同浓度5’‐Aza‐CdR处理结直肠癌细胞株HT‐29和LoVo。应用 TaqMan探针为基础的实时定量PCR（Methylight）方法、SYBR Green PCR方法及蛋白印迹实验（Western blot）检测药物处理前后 HT‐29和LoVo细胞中Runx3基因的甲基化状态、mRNA和蛋白表达。结果 TaqMan探针为基础的实时定量PCR法检测HT‐29和LoVo细胞中Runx3蛋白在药物作用后异常甲基化得到逆转；实时荧光定量PCR和Western Blot检测到0．5，1．0，1．5μM 5’‐Aza‐CdR处理后Runx3基因mRNA和蛋白均重新表达，具有统计学意义（P均＜0．05）。结论结直肠癌细胞株 HT‐29和LoVo中Runx3启动子甲基化可能是导致该基因表达下调甚至失活的主要原因。5’‐Aza‐CdR能够较成功的逆转结直肠癌细胞株HT‐29和LoVo中Runx3基因的甲基化状态，并能恢复mRNA及蛋白重新表达。
作者：许春伟；王鲁平；王琳；葛畅；方园；张玉萍
来源：贵州医药 2015 年 9期
