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目的 探讨马兜铃酸(AA)诱导人肾小管上皮细胞株(HK-2)凋亡的可能机制.方法 (1)应用乳酸脱氢酶(LDH)释放试验检测AA的细胞毒作用.(2)应用Hoechst 33258荧光染色检测细胞凋亡指数(AI).(3)应用RT-PCR观察细胞p53 mRNA表达.(4)应用分光光度法检测细胞天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)活性.结果 (1)80,160μg/ml浓度AA刺激细胞48h后,LDH释放率显著性增高(P<0.01).(2)20、40μg/mL浓度AA刺激细胞48h后,可明显抑制细胞生长并诱导其凋亡.(3)AA诱导细胞凋亡时,p53 mRNA表达无明显变化(P>0.05).(4)AA诱导细胞凋亡时,Caspase-3酶活性显著升高(P<0.01).结论 体外条件下,AA可明显抑制HK-2细胞生长并诱导其凋亡;AA诱导HK-2凋亡途径可能是非p53依赖途径;凋亡过程中存Caspase-3酶的激活.

作者:李胜;唐德燊;刘华锋

来源:国际泌尿系统杂志 2012 年 32卷 3期

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作者:
李胜;唐德燊;刘华锋
来源:
国际泌尿系统杂志 2012 年 32卷 3期
标签:
肾小管 上皮细胞 脱噬作用 马兜铃酸 Kidney Tubules Epithelial cell Apoptosis Aristoloch Acid
目的 探讨马兜铃酸(AA)诱导人肾小管上皮细胞株(HK-2)凋亡的可能机制.方法 (1)应用乳酸脱氢酶(LDH)释放试验检测AA的细胞毒作用.(2)应用Hoechst 33258荧光染色检测细胞凋亡指数(AI).(3)应用RT-PCR观察细胞p53 mRNA表达.(4)应用分光光度法检测细胞天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)活性.结果 (1)80,160μg/ml浓度AA刺激细胞48h后,LDH释放率显著性增高(P<0.01).(2)20、40μg/mL浓度AA刺激细胞48h后,可明显抑制细胞生长并诱导其凋亡.(3)AA诱导细胞凋亡时,p53 mRNA表达无明显变化(P>0.05).(4)AA诱导细胞凋亡时,Caspase-3酶活性显著升高(P<0.01).结论 体外条件下,AA可明显抑制HK-2细胞生长并诱导其凋亡;AA诱导HK-2凋亡途径可能是非p53依赖途径;凋亡过程中存Caspase-3酶的激活.