目的 探讨微小RNA-487a-3p(miR-487a-3p)是否通过抑制其靶基因TM4SF1的表达影响肾癌细胞的增殖和侵袭.方法 采用LipofectamineTM 2000转染miR-487a-3p模拟物或miR-NC至肾癌细胞ACHN,分为实验组和对照组.实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测转染后miR-487a-3p的表达量,流式细胞术检测细胞周期进展情况,四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验检测细胞增殖活性,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力.构建TM4SF1野生型(WT)和突变型(Mut)的3'非编码区(3'UTR)-荧光素酶报告载体,通过双荧光素酶报告基因系统检测miR-487a-3p对TM4SF1基因野生型和突变型3'UTR荧光素酶活性的影响,并通过qPCR和Western blot检测转染两组细胞中TM4SF1基因mRNA及蛋白表达量的变化.结果 实验组和对照组ACHN细胞中miR-487a-3p的表达量分别为(33.12 ±3.35)和(1.04 ±0.18),差异有统计学意义(t =9.553,P＜0.001).实验组ACHN细胞周期在G0-G1期的细胞比例(58.42±2.15)较对照组(42.07±1.62)明显升高,差异有统计学意义(t=6.087,P=0.001).实验组ACHN细胞增殖活性较对照组明显降低(P＜0.05).实验组ACHN细胞侵袭数(114.70±20.38)较对照组(269.30±18.12)明显降低,差异有统计学意义(t=5.670,P=0.001).生物信息学软件和双荧光素酶报告基因检测实验结果表明TM4S

作者：张青汉；黄恩应；陈小刚；袁远

来源：国际泌尿系统杂志 2019 年 39卷 2期