目的:探究雷帕霉素(Rapa)对JAK2 V617F阳性HEL细胞增殖凋亡及程序性死亡受体1与其配体(PD-1/PD-L1)的影响.方法:体外培养JAK2 V617F突变阳性的人红白血病HEL细胞,分别加入浓度为10nM、50nM和100nM的Rapa,设立对照组,CCK-8检测细胞增殖抑制率.Caspase 3/7活性检测试剂盒检测各组细胞Caspase 3/7活性,Transwell小室观察各组细胞迁移能力,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况及P D-1/P D-L1表达情况,实时荧光定量聚合酶链反应检测各组细胞中JAK2和P D-1、PD-L1 mRNA变化,蛋白质印迹法检测各组哺乳类雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的表达.选取5名健康志愿者,分离其淋巴细胞与HEL细胞共培养,加入不同浓度的Rapa,流式细胞术检测各组Treg细胞数量变化.结果:CCK-8检测结果显示:不同终浓度Rapa(10nM、50nM、100nM)在72h时对细胞增殖抑制率分别为(33.33±4.6)％、(49.12±3.72)％、(55.16±4.14)％(P<0.05).在浓度50nM和100nM的Rapa作用HEL细胞24h后,其Caspase 3/7活性较对照组显著升高(均P<0.05),流式细胞术结果显示与对照组相比细胞凋亡率明显增加(P<0.05),PD-L1蛋白表达较对照组明显下降(P<0.05),JAK2和PD-L1 mRNA表达量较对照组显著下调(P<0.01).健康志愿者淋巴细胞与HEL细胞共培养24h后,其Treg细胞增加(P<0.05),而加入Rapa

作者：齐林；王蕊；谢旭磊；张朝；成志勇；付建珠

来源：河北医学 2022 年 28卷 5期