目的 利用原代培养的小鼠脑星形胶质细胞(astrocytes,AS),探讨c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号转导通路是否参与镉致小鼠脑星形胶质细胞凋亡的过程.方法 原代培养的小鼠脑星形胶质细胞给予0~20 μmol/L镉染毒0~24 h,倒置相差显微镜观察细胞形态变化;给予0~20 μmol/L镉染毒9、12h,采用MTT法检测细胞存活率;给予0~20 μmol/L镉染毒12h,采用AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率;给予0~20 μmol/L镉染毒0~12h,采用蛋白印迹(Westernblotting)法检测JNK磷酸化蛋白的表达水平.结果 镉浓度为5~20 μmol/L时,随染毒剂量的升高及作用时间的延长,细胞形态发生明显改变:细胞间网络连接松散,突起消失,胞体收缩成球形,贴壁能力下降,最终脱落,漂浮于培养液中.与对照组比较,各浓度镉染毒9、12h后小鼠脑星形胶质细胞的存活率均下降,差异有统计学意义(P<0.01);且随着镉染毒浓度的升高和染毒时间的延长,小鼠脑星形胶质细胞的存活率均呈下降趋势.与对照组比较,各浓度镉染毒12h后小鼠脑星形胶质细胞的凋亡率均升高,差异有统计学意义(P<0.01);且随着镉染毒浓度的升高,小鼠脑星形胶质细胞的凋亡率均呈上升趋势.与对照组比较,5~20 μmol/L镉染毒3h后小鼠脑星形胶质细胞内p-JNK表达量均升高,20μmol/L镉染毒6h后
作者:姚云;戈果;周静;谢骐骥;令狐艳;罗道朋;余资江
来源:环境与健康杂志 2016 年 33卷 6期