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目的:探讨实验室常用的人胰腺癌细胞株BXPC-3的有效转染方法及最佳转染参数。方法通过脂质体法和电穿孔法将表达绿色荧光蛋白的质粒( pGFP-N3)导入人胰腺癌细胞株BXPC-3中,24 h后观察并比较细胞的存活率及瞬转效率,确定最佳转染参数。结果常规脂质体法BXPC-3细胞瞬转阳性率为1.36%,细胞存活率为87.45%;而电穿孔法在电压120 V电击时程70μs条件下,BXPC-3细胞瞬转阳性率为54.78%,细胞存活率为64.01%,2种转染方法的瞬转阳性率差异有统计学意义(P<0.05)。结论转染BXPC-3细胞,电穿孔法可取得比常规脂质体法更高的转染效率。通过条件的优化,电穿孔法可以用于某些脂质体法难以有效转染的细胞株。

作者:卜海激;王毛毛

来源:海军医学杂志 2014 年 6期

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作者:
卜海激;王毛毛
来源:
海军医学杂志 2014 年 6期
标签:
细胞转染 电穿孔法 脂质体法 胰腺癌 Cell transfection Lipofectamine Electroporation Pancreatic cancer
目的:探讨实验室常用的人胰腺癌细胞株BXPC-3的有效转染方法及最佳转染参数。方法通过脂质体法和电穿孔法将表达绿色荧光蛋白的质粒( pGFP-N3)导入人胰腺癌细胞株BXPC-3中,24 h后观察并比较细胞的存活率及瞬转效率,确定最佳转染参数。结果常规脂质体法BXPC-3细胞瞬转阳性率为1.36%,细胞存活率为87.45%;而电穿孔法在电压120 V电击时程70μs条件下,BXPC-3细胞瞬转阳性率为54.78%,细胞存活率为64.01%,2种转染方法的瞬转阳性率差异有统计学意义(P<0.05)。结论转染BXPC-3细胞,电穿孔法可取得比常规脂质体法更高的转染效率。通过条件的优化,电穿孔法可以用于某些脂质体法难以有效转染的细胞株。