目的:观察Notch信号通路调控对胚胎干细胞向心肌细胞分化的影响.方法:实验分为两部分:调控Notch信号通路开关,研究其对胚胎干细胞向心肌细胞分化比例的影响及心肌分化相关蛋白表达的影响.在小鼠胚胎干细胞培养的基础上,加入Notch信号激活剂Jagged蛋白(5 mg/L)或Notch信号抑制剂MW167(100 μmol/L)作用14 d,检测:①自发性节律收缩细胞的出现情况;②心肌特异性收缩蛋白的表达情况,计算胚胎干细胞分化为心肌细胞的比例;③采用Western blot方法检测胚胎干细胞源性心肌细胞中心肌分化相关蛋白(Nkx2.5、GA-TA4、Tbx5、Myocardin)的表达.结果:与对照组(胚胎干细胞自发分化组)相比,加入Jagged蛋白后,胚胎干细胞向心肌细胞分化的比例和早期心肌分化相关蛋白表达水平均显著减少;而加入MW167后,分化比例及早期心肌分化相关蛋白均显著增加.结论:胚胎干细胞中加入Jagged蛋白持续激活Notch信号,抑制了胚胎干细胞向心肌细胞分化;而加入MW167持续抑制Notch信号,则促进了胚胎干细胞向心肌细胞分化.
作者:胡家芸;徐红新;田毅浩;曲折;黄文蔚;蒋学俊;李庚山
来源:武汉大学学报(医学版) 2013 年 34卷 4期