目的 观察尿酸处理下大鼠心肌细胞系H9C2的损伤和NLRP3炎性小体的活化情况,探讨可溶性尿酸活化NLRP3炎性小体的机制.方法 采用不同质量浓度的尿酸处理H9C2 12 h、24 h和48 h,通过MTS和乳酸脱氢酶(LDH)检测细胞活力,以反映细胞损伤情况,同时采用流式细胞术(FCM)分析H9C2凋亡情况.通过Western blot检测NLRP3炎性小体相关分子[NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和Caspase-1]的蛋白水平.分离线粒体和胞质,Western blot检测细胞色素C的释放情况,评价线粒体损伤情况.MTS和LDH检测活性氧(ROS)抑制剂N-乙酰基-L-半胱氨酸(NAC)对细胞活力的影响,real time-PCR及Western blot检测NAC对NLRP3炎性小体活化的改善情况.最后采用Western blot和免疫荧光检测解偶联蛋白2(UCP2)蛋白的表达.结果 随着尿酸浓度的增加,细胞损伤和凋亡加剧,且具有时间依赖性;尿酸可上调NLRP3炎性小体相关分子的表达,并导致线粒体受损;NAC可改善细胞损伤并抑制NLRP3炎性小体相关mRNA和蛋白的活化;尿酸还可下调UCP2的表达.结论 尿酸下调UCP2蛋白的表达,诱导线粒体损伤,激活NLRP3炎性小体,导致心肌细胞损伤.
作者：王冠丽；袁红敏；王珍凤；宗贝贝；叶阳；张军；张海龙
来源：四川大学学报（医学版） 2018 年 49卷 4期
