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目的 研究miR-125a-5p对急性髓系白血病(AML)细胞系增殖和侵袭的调控作用.方法 RT-qPCR检测AML患者骨髓标本、AML细胞系(U937和HL60)及外周血单个核细胞(PBMC)中miR-125a-5p和TRIM71的表达.将U937和HL60细胞分为对照组(control)、miR-125a-5p模拟物组(miR-125a-5p mimic)、miRNA阴性对照组(miR-NC)、TRIM71过表达质粒组(pcDNA3.1-TRIM71)和对照质粒组(pcDNA3.1-NC).采用Lipofectamine 2000将miR-125a-5p mimic、pcDNA3.1-TRIM71及阴性对照转染U937和HL60细胞.MTT法检测细胞增殖,基质胶侵袭试验测定细胞侵袭,流式细胞测量术检测细胞凋亡.RT-qPCR或Western blot检测TRIM71、Bax、Bcl-2、NF-κB p65的表达.通过荧光素酶报告基因验证miR-125a-5p和TRIM71的靶向调控关系.结果 与对照或PBMC相比,miR-125a-5p在AML患者骨髓样本和AML细胞系中的表达水平明显降低(P<0.05).与对照组相比,miR-125a-5p mimic组的U937和HL60细胞的增殖和侵袭能力明显降低,而细胞凋亡率明显升高(P<0.05).与对照组相比,pcDNA3.1-TRIM71组的U937和HL60细胞的增殖和侵袭能力明显升高(P<0.05).荧光素酶报告基因检测显示,miR-125a-5p mimic有效抑制了pGL3-TRIM71-WT的荧光素酶活性.与miR-125a-5p mimic组相比,(miR-125a-5p mimic+pcDNA3.1-TR

作者:高秋英;荀利如;李岚;侯丽敏;周伟;王晖

来源:基础医学与临床 2021 年 41卷 11期

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作者:
高秋英;荀利如;李岚;侯丽敏;周伟;王晖
来源:
基础医学与临床 2021 年 41卷 11期
标签:
急性髓系白血病;miR-125a-5p;增殖;侵袭;凋亡;NF-κB信号通路
目的 研究miR-125a-5p对急性髓系白血病(AML)细胞系增殖和侵袭的调控作用.方法 RT-qPCR检测AML患者骨髓标本、AML细胞系(U937和HL60)及外周血单个核细胞(PBMC)中miR-125a-5p和TRIM71的表达.将U937和HL60细胞分为对照组(control)、miR-125a-5p模拟物组(miR-125a-5p mimic)、miRNA阴性对照组(miR-NC)、TRIM71过表达质粒组(pcDNA3.1-TRIM71)和对照质粒组(pcDNA3.1-NC).采用Lipofectamine 2000将miR-125a-5p mimic、pcDNA3.1-TRIM71及阴性对照转染U937和HL60细胞.MTT法检测细胞增殖,基质胶侵袭试验测定细胞侵袭,流式细胞测量术检测细胞凋亡.RT-qPCR或Western blot检测TRIM71、Bax、Bcl-2、NF-κB p65的表达.通过荧光素酶报告基因验证miR-125a-5p和TRIM71的靶向调控关系.结果 与对照或PBMC相比,miR-125a-5p在AML患者骨髓样本和AML细胞系中的表达水平明显降低(P<0.05).与对照组相比,miR-125a-5p mimic组的U937和HL60细胞的增殖和侵袭能力明显降低,而细胞凋亡率明显升高(P<0.05).与对照组相比,pcDNA3.1-TRIM71组的U937和HL60细胞的增殖和侵袭能力明显升高(P<0.05).荧光素酶报告基因检测显示,miR-125a-5p mimic有效抑制了pGL3-TRIM71-WT的荧光素酶活性.与miR-125a-5p mimic组相比,(miR-125a-5p mimic+pcDNA3.1-TR