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目的:探讨水飞蓟宾对胰腺癌 AsPC -1细胞的增殖抑制作用及其作用机制.方法:MTT 法和克隆形成抑制实验观察水飞蓟宾对人胰腺癌 AsPC -1细胞的增殖抑制作用,碘化丙锭(PI)单染色检测细胞周期改变,An-nexin V -FITC /PI 双染流式细胞术检测细胞凋亡水平,Western blotting 检测细胞周期及细胞凋亡相关蛋白的表达.结果:不同浓度的水飞蓟宾对胰腺癌 AsPC -1细胞的生长均有抑制作用,且呈剂量-效应和时间-效应关系(P <0.05),水飞蓟宾作用于 AsPC -1细胞48、72 h 的 IC50浓度分别为224.20、87.25μmol/L;克隆形成抑制实验显示,随着水飞蓟宾浓度增加,AsPC -1细胞克隆形成逐渐减少.细胞周期检测结果显示,随着水飞蓟宾浓度的增加,胰腺癌 AsPC -1细胞出现明显 G1期阻滞;水飞蓟宾处理组细胞的周期蛋白 CyclinD1、CyclinE2、CyclinA、CyclinB1表达下降,细胞周期蛋白激酶 CDK4、CDK6表达不变,细胞周期素依赖性蛋白激酶抑制蛋白 P15 INK4B、P21 WAF1/CIP1表达升高,与流式检测的结果相一致.不同浓度水飞蓟宾作用48 h 后,出现明显的凋亡细胞群;同时发现 Caspase -9、Caspase -3活化降解,Caspase3下游效应蛋白 PARP 出现切割条带.JNK 蛋白表达增加并磷酸化活化,Bcl -2蛋白家族

作者:王莉;张晓凯;张鹏;王娟娟;吴志慧;林晨;蒋建伟

来源:暨南大学学报(自然科学与医学版) 2015 年 1期

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作者:
王莉;张晓凯;张鹏;王娟娟;吴志慧;林晨;蒋建伟
来源:
暨南大学学报(自然科学与医学版) 2015 年 1期
标签:
水飞蓟宾 胰腺癌 AsPC -1 细胞 细胞周期 凋亡 Silibinin pancreatic cancer AsPC-1 cells cell cycle distribution apoptosis
目的:探讨水飞蓟宾对胰腺癌 AsPC -1细胞的增殖抑制作用及其作用机制.方法:MTT 法和克隆形成抑制实验观察水飞蓟宾对人胰腺癌 AsPC -1细胞的增殖抑制作用,碘化丙锭(PI)单染色检测细胞周期改变,An-nexin V -FITC /PI 双染流式细胞术检测细胞凋亡水平,Western blotting 检测细胞周期及细胞凋亡相关蛋白的表达.结果:不同浓度的水飞蓟宾对胰腺癌 AsPC -1细胞的生长均有抑制作用,且呈剂量-效应和时间-效应关系(P <0.05),水飞蓟宾作用于 AsPC -1细胞48、72 h 的 IC50浓度分别为224.20、87.25μmol/L;克隆形成抑制实验显示,随着水飞蓟宾浓度增加,AsPC -1细胞克隆形成逐渐减少.细胞周期检测结果显示,随着水飞蓟宾浓度的增加,胰腺癌 AsPC -1细胞出现明显 G1期阻滞;水飞蓟宾处理组细胞的周期蛋白 CyclinD1、CyclinE2、CyclinA、CyclinB1表达下降,细胞周期蛋白激酶 CDK4、CDK6表达不变,细胞周期素依赖性蛋白激酶抑制蛋白 P15 INK4B、P21 WAF1/CIP1表达升高,与流式检测的结果相一致.不同浓度水飞蓟宾作用48 h 后,出现明显的凋亡细胞群;同时发现 Caspase -9、Caspase -3活化降解,Caspase3下游效应蛋白 PARP 出现切割条带.JNK 蛋白表达增加并磷酸化活化,Bcl -2蛋白家族