目的 观察磷酸化增强型绿色荧光蛋白-N-myc下游调节基因N3(pEGFP-NDRG1-N3)上调N-myc下游调节基因1(NDRG1)表达的胰腺癌细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响并探讨其机制.方法 以Westernblot法对PANC-1、BXPC-3、CAPAN-2、SW1990细胞中NDRG1表达进行检测;构建过表达质粒pEGFP-NDRG1-N3转染CAPAN-2细胞,以免疫荧光、Western blot法及实时定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测上调效率;采用甲基噻唑基四唑(MTT)法检测转染后细胞增殖;碘化丙啶(PI)法检测细胞周期;流式细胞术检测细胞凋亡.结果 Western blot显示,NDRG1在4组细胞株中均有表达,而在低分化细胞(PANC-1)中的表达量要高于中分化(BXPC-3)及高分化细胞株(CAPAN-2、SW1990)(P＜0.05);免疫荧光显示,pEGFP-NDRG1-N3组荧光细胞数占总细胞数＞70％,NDRG1在蛋白及mRNA水平表达上调;在mRNA水平,NDRG1表达上调后Parp、Cleaved Parp、p-P53、Cleaved-Capase3无改变(t=1.456、1.164、2.914和1.075,P＞0.05).在蛋白水平,Parp表达下调,Cleaved Parp表达上调,p-P53下调,Cleaved-Capase3下调(t=6.104、12.273、3.691和14.227,P ＜0.05);MTT显示,在96和120 h与pEGFP-N3组比较,pEGFP-NDRG1-N3转染后CAPAN-2细胞增殖能力增强(t =8.176和2.246,P＜0.05);PI法显示,转染pEGFP

作者：张小薄；石刚；谭晓冬；杨一帆；王怀涛

来源：中国现代医学杂志 2015 年 25卷 26期