目的：设计、构建并包装靶向 c-myc 基因的 CRISPR／Cas9腺病毒；评估靶向 c-myc 基因的 CRISPR／Cas9腺病毒系统对肝癌的抑制作用。方法：采用生物信息学网站设计靶向 c-myc 基因的 gRNA，以 GFP 作为对照设计GFP gRNA；通过 T7E1筛选出编辑效率高的 gRNA 并将筛选的 gRNA 构建 CRISPR／Cas9腺病毒载体并包装腺病毒，通过分析细胞增殖、周期和凋亡及迁移能力的变化来评估靶向 c-myc 基因的 CRISPR／Cas9腺病毒系统对肝癌的抑制作用。结果：成功设计、构建并包装靶向 c-myc 基因的 CRISPR／Cas9腺病毒；靶向 c-myc 基因的 CRISPR／Cas9腺病毒系统能够显著抑制 Hepa1-6细胞的增殖和迁移、阻滞细胞周期进程，但对细胞凋亡无影响。结论：靶向 c-myc 基因的 CRISPR／Cas9腺病毒系统可在细胞水平明显抑制肝癌细胞的生长。
作者：连竹生；梁鑫；金桂花；吴领知；韩苏夏
来源：暨南大学学报（自然科学与医学版） 2016 年 37卷 4期
