目的:构建在哺乳动物细胞中表达的膜联蛋白A5(anxA5)的重组质粒,并在真核细胞中表达.方法:用PCR方法从pJLA503-anxA5质粒中扩增anx A5的基因序列,引入酶切位点Xho I和Bam HI.将真核表达质粒pEGFP-N1和anxA5的PCR产物经双酶切后用T4连接酶连接,并经鉴定序列正确后,用磷酸钙共沉淀法稳定转染Hela细胞,荧光显微镜下观察;免疫细胞化学染色观察anxA5在Hela细胞的表达.结果:重组质粒鉴定正确,稳定转染Hela细胞,在荧光显微镜下可见绿色荧光,免疫细胞化学染色可见anxA5表达.结论:成功构建了pEGFP-anxA5重组质粒,并能在宫颈癌细胞系Hela细胞中表达,为研究anxA5的功能及其在细胞系中的作用奠定了基础.
作者：李欣；高福禄；王芳；何颖；孙树汉
来源：解剖学杂志 2006 年 29卷 4期
