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目的 构建增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记的Hela细胞系.方法 PCR和DNA测序鉴定pEGFP-C1真核表达质粒,采用Qiagen tip 500进行pEGFP-C1真核表达质粒DNA的提取和纯化;cellfectin转染Hela细胞,G418筛选,有限稀释法单克隆培养,荧光显微镜进行荧光检测EGFP的表达,采用激光共聚焦显微镜观测器检测荧光特性.结果 PCR和DNA测序证实pEGFP质粒结构正确;在倒置荧光显微镜下,转染24h后,部分Hela细胞可见绿色荧光,转染72h时,大约80

作者:杨军;陈晓黎;苏宝山;王一理;司履生

来源:西安交通大学学报(医学版) 2008 年 29卷 6期

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作者:
杨军;陈晓黎;苏宝山;王一理;司履生
来源:
西安交通大学学报(医学版) 2008 年 29卷 6期
标签:
增强型绿色荧光蛋白 宫颈癌 Hela细胞
目的 构建增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记的Hela细胞系.方法 PCR和DNA测序鉴定pEGFP-C1真核表达质粒,采用Qiagen tip 500进行pEGFP-C1真核表达质粒DNA的提取和纯化;cellfectin转染Hela细胞,G418筛选,有限稀释法单克隆培养,荧光显微镜进行荧光检测EGFP的表达,采用激光共聚焦显微镜观测器检测荧光特性.结果 PCR和DNA测序证实pEGFP质粒结构正确;在倒置荧光显微镜下,转染24h后,部分Hela细胞可见绿色荧光,转染72h时,大约80