目的观察EGFP-Apoptin融合蛋白在肿瘤细胞中的分布和亚细胞定位,探讨Apoptin诱导肿瘤细胞凋亡的机制.方法构建EGFP-Apoptin融合蛋白真核表达载体,用脂质体转染技术将其导入人肝癌细胞株HepG2中,在荧光显微镜下观察Apoptin在肿瘤细胞中的分布、亚细胞定位;用TUNEL法检测其在体外诱导肿瘤细胞凋亡的效应.结果转染细胞中EGFP-Apoptin在肿瘤细胞中得以高表达,转染24 h后逐渐从细胞质迁移至细胞核,最后定位于细胞核内.转染4~5 d后逐渐诱导肿瘤细胞凋亡.结论 EGFP-Apoptin融合蛋白在肿瘤细胞中具有核定位效应,并诱导肿瘤细胞凋亡;EGFP-Apoptin可以作为研究Apoptin在肿瘤细胞中分布和亚细胞定位的有效工具,用以探讨Apoptin在体外诱导肿瘤细胞凋亡的机制.
作者:寇冰;彭冬君;孙军;田俊;宗义强;屈伸
来源:华中科技大学学报(医学版) 2006 年 35卷 3期