目的 研究温度和酸度对田鼠型鼠疫耶尔森菌psa位点的转录调控作用.方法 首先设计相关跨基因引物,用RT-PCR方法验证sa位点的相关操纵子结构.扩增操纵子首基因上游启动子区500 nt序列,并克隆入pRW50质粒β-半乳糖苷酶基因的上游,将重组质粒转入鼠疫菌中,通过测定β-半乳糖苷酶活性差异来判断不同温度(26和37℃)和酸度(pH 6.0和pH 8.0)对psaE和psaA的调控关系.最后提取鼠疫菌在上述不同温度和酸度条件下的总RNA,采用引物延伸实验进一步明确温度和酸度对psaA的调控关系.结果与结论 RT-PCR结果证实了田鼠型鼠疫菌的psa位点由操纵子psaEF和psaABC构成；半乳糖苷酶和引物延伸实验结果显示在37℃、pH 6.0培养条件下psaABC的转录水平最高,而psaEF的转录水平无明显变化,提示psaA的表达水平在37C酸性条件下表达量最高,psaE则不受温度和酸度的调控.
作者：刘子中；张义全；周冬生；杨瑞馥；韩延平
来源：军事医学 2013 年 37卷 8期
