目的:调控miR-195在乳腺癌细胞中的表达对阿霉素药物(ADR )敏感性的影响及其作用机制进行研究。方法利用脂质体将成熟miR-195模拟物(miR-195 mimic)及阴性对照转染至乳腺癌细胞MCF-7,采用实时定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测细胞中miR-195的表达变化;采用M T T比色法及流式细胞术(FCM )检测转染miR-195模拟物及其对照经ADR作用后细胞的增殖及凋亡;Western-blot检测细胞中Raf-1、P-gp、Bcl-2蛋白的表达。结果转染miR-195 mimic后,明显上调了细胞中miR-195的表达水平(P<0.01);在miR-195 mimic与ADR联合作用后,明显抑制了细胞的增殖,其敏感性与对照组相比,提高近2.5倍(P<0.05),同时促进了细胞的凋亡(P<0.05);Western-blot检测发现在转染miR-195 mimic后,细胞中Raf-1蛋白及BCL-2、P-gp蛋白的表达显著降低(P<0.01)。结论在乳腺癌细胞中,miR-195作为抑癌基因,能够有效促进乳腺癌细胞对ADR所介导的化疗敏感性,其作用机制至少部分是通过miR-195负性调控Raf-1蛋白的表达来实现。
作者:杨舸;蒋鸥;吴道全;袁平衷;李传达;翁亚光;朱静;田杰
来源:检验医学与临床 2014 年 15期