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目的 探讨低氧诱导因子-1α(HIF-1α)短发卡RNA(shRNA)沉默HIF-1α基因的表达对人耐阿霉素乳腺癌细胞MCF-7/ADR耐药能力的影响.方法 应用HIF-1αshRNA重组载体质粒转染MCF-7/ADR细胞,荧光显微镜观察细胞转染过程,G418筛选稳定表达HIF-1 αshRNA重组载体质粒的细胞,倒置显微镜观察低氧24、48 h细胞生长情况,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测HIF-1α基因的表达情况,细胞计数试剂盒(CCK-8)实验鉴定细胞株的耐药性.结果 荧光显微镜下可见细胞内荧光显示,镜下可见低氧培养细胞典型凋亡,转染后的MCF-7/ADR细胞阿霉素敏感性增加(P<0.05),对阿霉素半数抑制浓度(IC50)下降6.68倍.结论 HIF-1α shRNA可以有效阻断MCF-7/ADR细胞HIF-1α的表达,抑制细胞生长,调控HIF-1α表达水平可能影响其细胞耐药特性,增加对化疗药物阿霉素的敏感性.

作者:张慧峰;刘晗;秦秉玉;程剑剑;樊清波;王存真;张爱清

来源:中华实验外科杂志 2016 年 33卷 4期

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作者:
张慧峰;刘晗;秦秉玉;程剑剑;樊清波;王存真;张爱清
来源:
中华实验外科杂志 2016 年 33卷 4期
标签:
乳腺癌细胞 耐药性 缺氧诱导因子-1α 阿霉素 Breast cancer cells Drug resistance Hypoxia-induciblefactor-1α Adriamycin
目的 探讨低氧诱导因子-1α(HIF-1α)短发卡RNA(shRNA)沉默HIF-1α基因的表达对人耐阿霉素乳腺癌细胞MCF-7/ADR耐药能力的影响.方法 应用HIF-1αshRNA重组载体质粒转染MCF-7/ADR细胞,荧光显微镜观察细胞转染过程,G418筛选稳定表达HIF-1 αshRNA重组载体质粒的细胞,倒置显微镜观察低氧24、48 h细胞生长情况,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测HIF-1α基因的表达情况,细胞计数试剂盒(CCK-8)实验鉴定细胞株的耐药性.结果 荧光显微镜下可见细胞内荧光显示,镜下可见低氧培养细胞典型凋亡,转染后的MCF-7/ADR细胞阿霉素敏感性增加(P<0.05),对阿霉素半数抑制浓度(IC50)下降6.68倍.结论 HIF-1α shRNA可以有效阻断MCF-7/ADR细胞HIF-1α的表达,抑制细胞生长,调控HIF-1α表达水平可能影响其细胞耐药特性,增加对化疗药物阿霉素的敏感性.