目的 构建Survivin 基因特异性小干扰RNA(siRNA),检测siRNA-Survivin对Survivin基因表达的抑制,在人肝癌细胞株HepG2中研究 survivin和 survivin siRNA 对细胞凋亡的影响.方法 设计survivin siRNA序列,构建靶向 Survivin siRNA 真核载体.利用脂质体转染人肝癌HepG2细胞,通过相差显微镜下观察、四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)及反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)观察转染后survivin的表达,以及HepG2细胞的凋亡.结果 成功构建了survivin siRNA表达载体,并且si-survivin对survivin有明显抑制效应,可显著抑制HepG2细胞的发生凋亡.转染Survivin-siRNA 细胞活性受到显著抑制(P<0.05),光镜下出现明显的凋亡形态,DNA电泳出现典型的凋亡"梯状"带.RT-PCR 结果显示细胞转染24 h、48 h和72 h 后HepG2 Survivin mRNA 分别减少了56
作者：薛净；李瑜元；聂玉强；沙卫红；张亚历；周殿元
来源：临床和实验医学杂志 2012 年 11卷 7期
