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目的 观察抗β2GPⅠ-β2GPⅠ复合物刺激小鼠腹腔巨噬细胞表达TNF-α、IL-1β、IL-6的效果,探讨Toll样受体4(TLR4)在其中的作用.方法 对C3H/HeN(TLR4正常)小鼠、C3H/HeJ(TLR4缺陷)小鼠腹腔注射非特异性兔IgG (R-IgG)、抗β2GPⅠ抗体,72 h后用细胞免疫荧光法检测小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α、IL-1β、IL-6的表达水平;抗β2GPⅠ-β2GPⅠ复合物对小鼠腹腔巨噬细胞进行体外刺激,荧光定量PCR法检测细胞表达上述因子的mRNA水平,westem blot法检测其蛋白质分泌水平.结果 抗β2GP Ⅰ抗体刺激的C3H/HeN小鼠腹腔巨噬细胞产生TNF-α、IL-1β、IL-6的水平明显高于C3H/HeJ小鼠,并经细胞免疫荧光法验证;经体外刺激后,荧光定量PCR法结果显示抗β2GP Ⅰ-β2GP Ⅰ复合物诱导C3H/HeN小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达水平高于空白组或C3H/HeJ刺激组(P均<0.01);western blot结果显示C3 H/HeN来源细胞TNF-α、IL-1β、IL-6分泌均显著高于C3H/HeJ来源细胞(P均<0.01).结论 抗β2GP Ⅰ-β2GP Ⅰ复合物能够促进小鼠腹腔巨噬细胞炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6的表达,TLR4为介导此过程的受体之一.

作者:孔祥民;周红;解鸿翔;谢娅超;何超;成思;于尹婧;夏龙飞

来源:临床检验杂志 2014 年 32卷 12期

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作者:
孔祥民;周红;解鸿翔;谢娅超;何超;成思;于尹婧;夏龙飞
来源:
临床检验杂志 2014 年 32卷 12期
标签:
抗磷脂综合征 抗β2GPⅠ-β2GPⅠ复合物 Toll样受体4 小鼠腹腔巨噬细胞 炎症因子 antiphospholipid syndrome anti-β2 GP Ⅰ/β2 GP Ⅰ complex Toll-like receptor 4 mouse peritoneal macrophage inflammatory factor
目的 观察抗β2GPⅠ-β2GPⅠ复合物刺激小鼠腹腔巨噬细胞表达TNF-α、IL-1β、IL-6的效果,探讨Toll样受体4(TLR4)在其中的作用.方法 对C3H/HeN(TLR4正常)小鼠、C3H/HeJ(TLR4缺陷)小鼠腹腔注射非特异性兔IgG (R-IgG)、抗β2GPⅠ抗体,72 h后用细胞免疫荧光法检测小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α、IL-1β、IL-6的表达水平;抗β2GPⅠ-β2GPⅠ复合物对小鼠腹腔巨噬细胞进行体外刺激,荧光定量PCR法检测细胞表达上述因子的mRNA水平,westem blot法检测其蛋白质分泌水平.结果 抗β2GP Ⅰ抗体刺激的C3H/HeN小鼠腹腔巨噬细胞产生TNF-α、IL-1β、IL-6的水平明显高于C3H/HeJ小鼠,并经细胞免疫荧光法验证;经体外刺激后,荧光定量PCR法结果显示抗β2GP Ⅰ-β2GP Ⅰ复合物诱导C3H/HeN小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达水平高于空白组或C3H/HeJ刺激组(P均<0.01);western blot结果显示C3 H/HeN来源细胞TNF-α、IL-1β、IL-6分泌均显著高于C3H/HeJ来源细胞(P均<0.01).结论 抗β2GP Ⅰ-β2GP Ⅰ复合物能够促进小鼠腹腔巨噬细胞炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6的表达,TLR4为介导此过程的受体之一.